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2025
8-13流式細(xì)胞檢測技術(shù)(FlowCytometry,簡稱FCM)在細(xì)胞生物學(xué)研究中具有重要地位,特別是在細(xì)胞周期與凋亡的檢測方面。以下是對(duì)流式細(xì)胞檢測技術(shù)在細(xì)胞周期與凋亡應(yīng)用方面的詳細(xì)闡述:一、流式細(xì)胞檢測技術(shù)概述流式細(xì)胞術(shù)是一種高效的用于單細(xì)胞分析/分選的生物學(xué)技術(shù),它利用流式細(xì)胞儀對(duì)處于快速直線流動(dòng)狀態(tài)中的單列細(xì)胞或生物顆粒進(jìn)行逐個(gè)、多參數(shù)、快速的定性、定量分析或分選。通過特定的熒光標(biāo)記抗體或染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色,流式細(xì)胞儀可以檢測細(xì)胞表面的標(biāo)記物、細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、DNA含量等,...
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8-12谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)是機(jī)體內(nèi)廣泛存在的一種重要的過氧化物分解酶,其活性中心是硒半胱氨酸(Sec),活力大小可反映機(jī)體硒水平。GPX能催化還原型谷胱甘肽(GSH)轉(zhuǎn)化為氧化型谷胱甘肽(GSSG),同時(shí)使有毒的過氧化物還原成無毒的羥基化合物,保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)及功能。它是抗氧化體系的重要組成部分,與超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)等協(xié)同清除體內(nèi)過剩的自由基和過氧化物。GPX的活力降低與多種疾病相關(guān),如克山病、癌癥等,而活力升高則可能與糖尿病等疾病有關(guān)。NADPH...
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8-12CD63(又稱溶酶體相關(guān)膜蛋白3/LAMP3)是四次跨膜蛋白超家族成員,主要定位于細(xì)胞膜、內(nèi)體及溶酶體。CD63參與多種細(xì)胞進(jìn)程,在晚期內(nèi)體和多泡體的細(xì)胞蛋白分選中發(fā)揮關(guān)鍵作用,促進(jìn)外泌體形成。它還參與介導(dǎo)細(xì)胞黏附遷移、促進(jìn)抗原呈遞及免疫激活。CD63在多種腫瘤中均有表達(dá),可促進(jìn)腫瘤生長并調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境,可作為癌癥治療的潛在靶標(biāo)。CD63是外泌體特異性標(biāo)志蛋白,為新型藥物遞送及靶向外泌體提供契機(jī),還可作為腫瘤的潛在標(biāo)志物(如卵巢癌、肺癌等)。近年來,CD63的研究已從基礎(chǔ)生物...
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8-6多肽合成技術(shù)服務(wù)的標(biāo)準(zhǔn)流程通常涉及多個(gè)關(guān)鍵步驟,以下是一個(gè)詳細(xì)的流程解析:一、明確需求與設(shè)計(jì)序列1.客戶需求溝通:與客戶進(jìn)行詳細(xì)溝通,了解其多肽合成的具體需求,包括目標(biāo)多肽的序列、純度、分子量、修飾要求等。2.序列設(shè)計(jì):根據(jù)客戶需求,利用專業(yè)的多肽設(shè)計(jì)軟件或工具(如MacVector、DNAStar、PC-Gene等)進(jìn)行多肽序列的設(shè)計(jì)和優(yōu)化??紤]氨基酸的理化性質(zhì)、多肽的結(jié)構(gòu)功能以及潛在的免疫原性,確保設(shè)計(jì)的序列合理且滿足客戶需求。二、合成方法選擇1.固相合成法(SPPS):...
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8-5CD3E(CD3epsilon)是T細(xì)胞受體-CD3復(fù)合物的關(guān)鍵亞基,參與抗原識(shí)別和T細(xì)胞活化。CD3E參與MAPK、NF-κB等信號(hào)通路的激活以及T細(xì)胞的活化過程,還涉及小腦發(fā)育、突觸生長及多種信號(hào)通路的調(diào)節(jié),如跨膜受體蛋白酪氨酸激酶信號(hào)通路、細(xì)胞凋亡信號(hào)通路等,對(duì)基因表達(dá)和細(xì)胞凋亡過程有重要影響。臨床應(yīng)用中,靶向CD3E的雙特異性抗體(如貝林妥歐單抗)通過橋接T細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞(如CD19+白血病細(xì)胞),將T細(xì)胞重定向至腫瘤細(xì)胞,引發(fā)T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用,達(dá)到治療目的。此...
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8-5谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GST)是生物體內(nèi)重要的多功能酶。作為Ⅱ相代謝酶,它催化谷胱甘肽與有害物質(zhì)結(jié)合,增加水溶性助其排出體外,發(fā)揮脫毒功能,尤其在生物體遭遇有機(jī)污染物、重金屬等逆境時(shí),其活性增加,保護(hù)機(jī)體免受損害。GST還具有抗氧化功能,可清除自由基和有害代謝產(chǎn)物,減少氧化應(yīng)激傷害,部分GST甚至有谷胱甘肽過氧化酶活性,能修復(fù)氧化破壞的大分子。此外,它還具備異構(gòu)酶活性、巰基轉(zhuǎn)移酶活性,參與酮類固醇異構(gòu)化反應(yīng)及催化巰基共價(jià)結(jié)合等過程。在非催化方面,GST能結(jié)合非底物配體,作為植物化...
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8-5神經(jīng)炎癥定義神經(jīng)炎癥是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS,即大腦和脊髓)內(nèi)由小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞等常駐細(xì)胞(有時(shí)包括浸潤的外周免疫細(xì)胞,如淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞)激活所介導(dǎo)的復(fù)雜免疫反應(yīng)過程,涉及多種促炎介質(zhì)(細(xì)胞因子、趨化因子、活性氧等)的釋放。神經(jīng)炎癥一般在CNS受損、感染、毒素的刺激下或在自身免疫的作用下會(huì)出現(xiàn)。最初是應(yīng)對(duì)損傷或威脅的保護(hù)性機(jī)制,但若反應(yīng)過度或慢性化,則會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)橛泻^程,導(dǎo)致神經(jīng)元損傷、功能障礙,并在多種神經(jīng)系統(tǒng)疾?。òㄉ窠?jīng)退行性疾病、腦損傷、感染、自身免疫病和精...
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7-28HIS標(biāo)簽抗體實(shí)現(xiàn)對(duì)重組蛋白的特異性結(jié)合,主要基于以下幾個(gè)關(guān)鍵原理和步驟:一、HIS標(biāo)簽的特性HIS標(biāo)簽是一種由6個(gè)或多個(gè)連續(xù)組氨酸殘基組成的肽段,通常被添加到目標(biāo)蛋白質(zhì)的N端或C端。組氨酸殘基對(duì)金屬離子(如鎳Ni??、鈷Co??等)具有較高的親和力,這使得帶有HIS標(biāo)簽的蛋白能夠與金屬螯合樹脂(如Ni-NTA或Co-NTA)特異性結(jié)合。二、金屬離子親和層析原理HIS標(biāo)簽抗體與重組蛋白的特異性結(jié)合主要通過金屬離子親和層析(ImmobilizedMetalIonAffinity...
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